ABSL-4實(shí)驗(yàn)室供從事氣溶膠傳播感染和高度危險(xiǎn)致病微生物的研究工作。與四級(jí)危險(xiǎn)度(我國(guó)為一級(jí))微生物具有相近或一致抗原關(guān)系的微生物也要在這一生物安全水平實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作，獲得足夠數(shù)據(jù)后，方可確定在這一生物安全水平連續(xù)工作或在較低水平的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作。實(shí)驗(yàn)室工作人員在處理極為有害的感染性致病微生物方面要經(jīng)過特殊和全面的培訓(xùn)。要了解安全標(biāo)準(zhǔn)和特殊操作規(guī)程，要熟悉一級(jí)和二級(jí)防護(hù)隔離設(shè)備的功能以及實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)要由經(jīng)過培訓(xùn)，對(duì)這些微生物有經(jīng)驗(yàn)的，具有法定資格的科學(xué)家來監(jiān)督管理。實(shí)驗(yàn)室主管要嚴(yán)格控制進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員。實(shí)驗(yàn)室是獨(dú)立的建筑物或是建筑物內(nèi)的隔離區(qū)。要制定和執(zhí)行一整套特殊的實(shí)驗(yàn)室安全工作細(xì)則。
在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，所有操作都要在Ⅲ級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。也可以聯(lián)合使用Ⅱ級(jí)生物安全柜和正壓工作服。ABSL-4實(shí)驗(yàn)室對(duì)防止微生物擴(kuò)散到環(huán)境中有特殊的工程和設(shè)計(jì)要求。
ABSL-4是在ABSL-3標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，特殊操作規(guī)程，隔離安全設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室設(shè)施要求水平的基礎(chǔ)上建立起來的。
(1)設(shè)施設(shè)備要求
1)適用時(shí)，應(yīng)符合動(dòng)物生物安全三級(jí)防護(hù)水平的要求。
2)淋浴間應(yīng)設(shè)置強(qiáng)制淋浴裝置。
3)動(dòng)物飼養(yǎng)間的緩沖間應(yīng)為氣鎖。
4)應(yīng)有嚴(yán)格限制進(jìn)入動(dòng)物飼養(yǎng)間的門禁措施。
5)動(dòng)物飼養(yǎng)間的氣壓(負(fù)壓)與室外大氣壓的壓差值應(yīng)不小于100Pa；與相鄰區(qū)域的壓差(負(fù)壓)應(yīng)不小于25Pa。
6)動(dòng)物飼養(yǎng)間及其緩沖間的氣密性應(yīng)達(dá)到在關(guān)閉受測(cè)房間所有通路并維持房間內(nèi)的溫度在設(shè)計(jì)范圍上限的條件下，當(dāng)房間內(nèi)的空氣壓力上升到500Pa后，20分鐘內(nèi)自然衰減的氣壓小于250Pa。
7)應(yīng)有裝置和技術(shù)對(duì)所有物品或其包裝的表面在運(yùn)出動(dòng)物飼養(yǎng)間前進(jìn)行清潔和可靠消毒滅菌。
(2)標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)操作規(guī)范
1)除由實(shí)驗(yàn)室主管為應(yīng)對(duì)緊急情況制定的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)程、管理?xiàng)l例和應(yīng)對(duì)方法外，如有需要，還可以根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定和要求制定一些特殊的規(guī)章制度和技術(shù)處理規(guī)程。
2)只有那些按計(jì)劃或工作目的需要在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的人員才有權(quán)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。免疫力降低或免疫缺陷者因有受傳染的危險(xiǎn)，不能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室主管負(fù)責(zé)審核并決定什么人可以進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室或在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作。實(shí)驗(yàn)室主管、生物危險(xiǎn)控制官員或負(fù)責(zé)設(shè)施保安的人員應(yīng)監(jiān)督實(shí)驗(yàn)室人員的進(jìn)、出。進(jìn)入前，要告知他們潛在的危險(xiǎn)性并進(jìn)行適當(dāng)?shù)陌踩Ｐl(wèi)工作，以確保其安全。受權(quán)進(jìn)入的人員要遵循進(jìn)、出的指示和程序。
3)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)針對(duì)所有工作人員制定適當(dāng)?shù)慕】当＝『歪t(yī)學(xué)監(jiān)督項(xiàng)目，包括：適當(dāng)?shù)拿庖哳A(yù)防接種，采集血清，建立感染后危害評(píng)估和處理協(xié)商機(jī)構(gòu)以及潛在危害預(yù)防措施。
4)設(shè)置自動(dòng)鎖定的安全門來限制進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室人員。工作人員要嚴(yán)格執(zhí)行進(jìn)、出規(guī)則和進(jìn)、出程序，要在工作時(shí)間表上簽字，以表明每個(gè)人進(jìn)出的時(shí)間。
5)要收集貯存所有實(shí)驗(yàn)室和其他有危險(xiǎn)人員的血清基準(zhǔn)樣品。血清樣本要依處理的病原微生物或?qū)嶒?yàn)室的功能而定期收集添加。確定血清監(jiān)測(cè)計(jì)劃時(shí)，要考慮對(duì)有關(guān)病原微生物抗體的評(píng)定方法。計(jì)劃中要規(guī)定每種樣品收集間隔期，進(jìn)行血清樣品的檢測(cè)程序，以及試驗(yàn)的最終結(jié)果。并將檢測(cè)結(jié)果告知受檢人員。
6)在工作區(qū)內(nèi)不允許飲食、吸煙、處理隱形鏡片和使用化妝品。戴隱形鏡片的人在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)還應(yīng)戴護(hù)目鏡或面罩。食品應(yīng)貯存在工作區(qū)外指定的食品儲(chǔ)藏柜內(nèi)或冰箱內(nèi)。
7)如實(shí)驗(yàn)室中或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有傳染物或受感染的動(dòng)物，要在入口門懸掛生物危險(xiǎn)警報(bào)標(biāo)志。危險(xiǎn)警報(bào)標(biāo)志要標(biāo)明病原微生物名稱，實(shí)驗(yàn)室主管或其他主管的姓名、電話號(hào)碼，并指明進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室需遵循的特殊要求(如需要免疫接種或戴呼吸器)。
8)實(shí)驗(yàn)室主管負(fù)責(zé)監(jiān)督在ABSL-4實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)工作，所有人員都要精通微生物操作和技術(shù)要求規(guī)范，精通實(shí)驗(yàn)室設(shè)施的特殊技術(shù)規(guī)范和作業(yè)要求。其中包括處理人的病原體和細(xì)胞培養(yǎng)的經(jīng)驗(yàn)。工作人員須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室主管或精通微生物安全規(guī)范和技術(shù)的科學(xué)工作者制訂的特定的培訓(xùn)計(jì)劃的培訓(xùn)。
9)所有操作都要仔細(xì)進(jìn)行，盡量減少產(chǎn)生氣溶膠或?yàn)R出污染物。
10)在與傳染有關(guān)的工作完成后，特別是當(dāng)傳染物顯性溢出、濺出或受傳染材料污染時(shí)，實(shí)驗(yàn)設(shè)備和工作表面應(yīng)立即進(jìn)行嚴(yán)格的消毒。污染的設(shè)備應(yīng)先消毒，然后再送去修理或維護(hù)保養(yǎng)。
11)溢出的傳染物要由專業(yè)人員或接受過濃縮傳染物培訓(xùn)的人員來進(jìn)行處理、保護(hù)和消毒。污染物溢出，并明顯造成傳染材料污染或其他偶發(fā)事故發(fā)生后，應(yīng)立即向室主管報(bào)告，并對(duì)發(fā)生的事故提出醫(yī)學(xué)評(píng)價(jià)，事故處理方案和適當(dāng)?shù)闹委煼椒?。寫出的?bào)告要妥善保存。
12)所有廢棄物(包括動(dòng)物組織、尸體、污染的墊料、吃剩下的飼料)，其他要處理的物品，應(yīng)清洗的工作服，要放在雙門高壓滅菌器內(nèi)消毒(高壓滅菌器安裝在二級(jí)隔離圍護(hù)結(jié)構(gòu)的外墻上)。消毒后的廢棄物要用燃燒法處理。
13)對(duì)受污染的銳利物品，包括針頭、注射器、載物片、吸液管、毛細(xì)管和手術(shù)刀必須采取高度防范措施。動(dòng)物室內(nèi)要限制針頭和注射器或其他銳利儀器的使用，只有缺乏其他替代物才可使用，如腸道外注射、靜脈切開術(shù)或從實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物或隔膜瓶中抽取液體。盡可能用塑料器皿代替玻璃器皿。
14)吸取傳染物時(shí)只能用針頭鎖定的注射器或一次性注射器(即，針頭與注射器是一個(gè)整體)。用過的一次性針頭不得折彎、剪切、破裂、翻新、不能用手從一次性注射器中除掉或處理污染物。處理的污染物要謹(jǐn)慎地放到專門用于處理銳利物品的容器中。非一次性銳利物品必須放在硬壁容器中，運(yùn)輸?shù)教幚韰^(qū)消毒，最好用高壓滅菌器滅菌。
15)必要時(shí)應(yīng)使用能夠再次封包針頭，無針頭系統(tǒng)和其他安全性注射器。
16)不得用手直接觸動(dòng)或搬運(yùn)破損的玻璃器皿。必須使用機(jī)械手段，如刷子、簸箕、或其他鉗狀工具。裝污染針頭、銳利器具和破損玻璃的容器要按規(guī)程先消毒，再處理。
17)從Ⅲ級(jí)生物安全柜或四級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室取出的、處于有生命或健存狀態(tài)的生物材料時(shí)，先要將其轉(zhuǎn)移到一個(gè)防破裂的密封性一次容器中，然后再密閉于防破裂的、密封性二次容器中，再通過化學(xué)消毒浸槽、熏蒸室或?qū)ｉT設(shè)計(jì)的氣閘運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。
18)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不允許存放與正在進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)無關(guān)的物品(如植物、動(dòng)物和衣服)。
19)實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室工作人員要接受與工作相關(guān)的危害評(píng)估，防止感染，預(yù)防方法和感染評(píng)價(jià)程序的培訓(xùn)。工作人員每年應(yīng)定期學(xué)習(xí)程序已修改的內(nèi)容或規(guī)則，并接受因程序內(nèi)容修改所必需的額外培訓(xùn)。
20)籠具在取出墊料和清洗之前，必須經(jīng)過高壓滅菌器或其他方法進(jìn)行滅菌消毒。
21)指派看管感染動(dòng)物的工作人員最好是兩人。根據(jù)危害評(píng)估：應(yīng)在實(shí)驗(yàn)中使用隔離籠具，動(dòng)物麻醉后作實(shí)驗(yàn)，或其他適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施，以減少工作人員出現(xiàn)接觸感染的危險(xiǎn)性。
(3)特殊操作規(guī)范
1)設(shè)置必要的監(jiān)控裝置，控制設(shè)施的出入口。如設(shè)置24小時(shí)監(jiān)測(cè)設(shè)備和出入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的檢查系統(tǒng)。
2)工作人員只有通過更衣室和淋浴室才能進(jìn)入和離開實(shí)驗(yàn)室，每次離開實(shí)驗(yàn)室都要淋浴。只有在發(fā)生事故時(shí)，實(shí)驗(yàn)室的工作人員才能通過氣鎖進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室。
工作人員要在外更衣室脫下便衣并存放在那里。要給進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的工作人員提供和使用全套的實(shí)驗(yàn)室服裝，包括外衣、褲子，內(nèi)衣，連衣褲工作服、鞋和手套等。當(dāng)離開實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)入淋浴室之前，工作人員要在內(nèi)更衣室脫去實(shí)驗(yàn)室工作服。臟衣服在清洗之前要高壓滅菌消毒。
3)在生物安全柜實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作的工作人員要在外更衣室脫掉便衣，并把便衣留在該處。進(jìn)入設(shè)施內(nèi)的所有人員都要穿戴全套實(shí)驗(yàn)室工作服，包括內(nèi)衣、褲子、內(nèi)褲、背心或襯衣、連體服、鞋和手套等。離開生物安全柜實(shí)驗(yàn)室后，進(jìn)入淋浴室前，要在內(nèi)更衣室脫掉實(shí)驗(yàn)室工作服。弄污的衣物要先高壓消毒，再送去洗滌。
4)在防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作的工作人員要通過更衣區(qū)和消毒區(qū)，進(jìn)入防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室。進(jìn)、出防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)、外更衣室中間通過淋浴室隔開。當(dāng)離開防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室時(shí)，防護(hù)服表面要進(jìn)行消毒，為此應(yīng)另設(shè)一個(gè)化學(xué)消毒淋浴室，專用于防護(hù)服表面消毒。
5)運(yùn)進(jìn)設(shè)施內(nèi)的供應(yīng)品和材料要通過雙門高壓滅菌器、熏蒸室或氣閘送入。氣閘每次使用之間要消毒。高壓滅菌器、熏蒸室的內(nèi)、外門要相互聯(lián)鎖。外門安全鎖定后，設(shè)施中的人員再打開內(nèi)門取出材料。材料帶入設(shè)施后把這些門安全鎖定。
6)要建立報(bào)告-監(jiān)視系統(tǒng)，報(bào)告實(shí)驗(yàn)室的事故和暴露情況，工作人員缺勤情況和實(shí)驗(yàn)室相關(guān)疾病的醫(yī)學(xué)監(jiān)視情況。要有書面記錄。本系統(tǒng)另一重要任務(wù)是，對(duì)疑似和患有實(shí)驗(yàn)室相關(guān)疾病的人員進(jìn)行檢疫、隔離和醫(yī)療護(hù)理。
